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關于改進和大力推行“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農殘”的建議

放大字體  縮小字體 發布日期:2014-08-19
核心提示:摘 要 本建議在原有基礎上作了技術上進行改進,使抑制率的檢測農殘數據更為科學、嚴謹可信,使之可作為執法依據提供技術支撐,
 摘 要 本建議在原有基礎上作了技術上進行改進,使抑制率的檢測農殘數據更為科學、嚴謹可信,使之可作為執法依據提供技術支撐,從而高效快速地實現農殘檢測,食品安全保障中有力的補充,對大幅節省檢測費用支出,保證食品安全有重大意義。

關鍵詞 乙酰膽堿酯酶(AchE ) 抑制率(inhibition ratio) 快速檢測(quick detection)

隨著人們的生活質量的不斷提高,健康意識不斷加強,中國農產品出口面臨重大機遇與挑戰的關鍵時期,國家認監委計劃舉辦“第十二屆全國HACCP應用與認證研討會”,可謂廣開言路,對有效控制食品安全事故發生,推進農產品出口,提升HACCP體系理論水平都具有重大意義。在此,筆者談談關于食品加工、流通環節中的關鍵控制點:在原料驗收環節,以及蔬菜、水果市場準入和出入境農殘檢測中,提出加大“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農殘”(以下簡稱“抑制率法”)應用力度的建議,以高效、快捷、低成本保證食品安全、避免引起農產品質量的國際糾紛來增加一道保險;且建議將“抑制率”作為判定是否合格的重要參考數據作為供有關管理部門的執法依據。
抑制率法最早源于西方醫學、農產品等領域,國內外的相關文獻不少。有的國家或地區,如東南亞及中國臺灣已將抑制率的檢測結果作為判定農產品是否允許進入市場流通的重要依據之一。2001年以來,中國出臺了《蔬菜上有機磷和安基甲酸酯類農藥殘毒快速檢測法》標準:NY/T448-2001和GB/T5009-2003。但若干年來,檢驗檢疫系統、農業部門在對快速檢測器具和檢測人員的培訓較為重視,在各地建立了大量的快速農殘站。筆者感覺這么好的方法,在應用上還缺乏一定的力度,如有些管理部門還未將抑制率作為執法依據。原因是上述兩個標準在抑制率檢測的測試方法上本身有一定的缺陷,導致重現性較差,使采信上存在一定的難度。筆者通過實踐,做了技術上的改進,解決了這方面的問題,使之科學性更強。
眾所周知,合格的農藥在農產品的生產中是不可缺的,若不施用農藥,農作物在成熟前或萌芽狀態基本就被病蟲害消滅了,導致農作物的減產或絕收。聰明的學者研究了可降解的安全農藥,在一定的時間內有毒性,確保農作物不受蟲害、霉菌和雜草的干擾,正常健康地生長,只要嚴格控制休藥期,農產品就安全無毒。每年數十萬噸、價格以億計的農藥用于田間地頭,農藥銷售、種植基地都有專業的植物醫生們做技術指導,但在利益驅動下,不懂科學亂用藥的、或購到假農藥的、追求華麗的外觀不嚴格遵守休藥期的現象難以避免,因此產生了農殘檢測的行業。
現今農殘檢測的設備主要是氣相色譜或氣質聯用儀等,這類設備能對農殘進行定性定量的準確測定,很多國家和地區的法規對各種農藥限量制定了標準,但檢測設備價格基本都在數十萬元以上,耗材費用高等諸多因素,導致檢測費高。目前通常按檢測農藥種類收費,每種農藥檢測費通常在150元到400余元。農藥的施用隨時間、地區及病害不同,所用農藥種類繁多,這就要求對農產品樣品進行多種農藥項目的檢測,一個樣品僅農殘項目的檢測費就高達一兩千元甚至更多,檢測費用多數情況下遠遠高于蔬菜水果本身的利潤,且從樣品送達到出具檢測報告耗時長達數天,更長的達數月。一邊是勞動密集型的生產者種植出價值在一、兩元一斤的農產品,鮮蔬菜水果保質期短,冷藏可稍微延長;另一邊是昂貴的進口的檢測設備、檢測費,還有一些專門從事農殘檢測的技術人員和漫長的檢測周期,還不等檢測結果出來,蔬菜水果早就變成肥料!特別是食品加工企業的原料檢測,若等檢測結果出來,早已經變質,不能用于食品加工了,失去了檢測意義!這,顯然是一個不等式。
消費者對所購的蔬菜水果是否安全無法判斷,無力對手中一把兩三元的菜支付數千元的檢測費。盡管目前檢測設備購置及檢測費用主要是國家投入進行管理,但對每天數以億計批次的蔬菜水果,色譜法的檢測力不從心,從互聯網中查到的數據表明,可謂杯水車薪,一些擁有數千萬元設施的機構每年所檢測的樣品數屈指可數,年檢測萬個樣品的實驗室寥寥無幾,能檢測的農藥種類相當局限,且檢測出率并不高。一次,筆者用酶抑制法對某地即將上市的水果蔬菜進行檢測,發現不合格率相當高,囑咐延長采收期,以確保產品質量與安全。
如何來解上面這個不等式呢?“快速檢測法”的問世,當仁不讓!目前快速主要有“速測卡法”、“抑制率法”,前者一個樣品檢測費通常在一兩元,后者則不超過十元(含人工、設備折舊、房租費),且檢測量越大,成本越低。速測卡法操作簡單,只要像PH試紙一樣,將測試紙在蔬菜樣品上擦幾下,用手心的溫度培養幾分鐘,觀查測試紙的顏色變化,就可確定是否為農藥陽性,可廣泛用于田間地頭,商販采購、大型食品加工、餐館等進貨時的質量把關用。而抑制率所用的設備主要是分光光度計、天平等,價值少則三五千,多則不過萬元的設備就可對大多數蔬菜、水果中的有機磷等農藥殘留是否達到安全指標做出準確判定,通常一個熟練的操作人員30分鐘可檢測4、5個樣品,一兩小時可測出20余個樣品。
快速檢測用的酶是一種從蒼蠅頭部、或動物如牛、雞的血清中提取物,稱為乙酰膽堿脂酶,對有機磷、安基甲酸酯類農藥極為敏感,在一定條件下與樣本中的農藥反應,可觀查到顏色的變化,或用分光光度計在412nm處檢測顏色的變化率,若顏色變化很快,宛若湖里的魚歡蹦亂跳,表明無毒,若顏色基本不變,活性被大大抑制,如水中的魚基本翻了肚子,則說明樣本中的農藥殘毒高,引用抑制率進行表述。以國標為例,抑制率高于50%為不合格,標準注明與氣相色譜法檢測結果吻合率達80%以上。可以形象理解為,在一塘水池中養100條魚,若死率在50條以上,則可以判定水中有毒,不能飲用,具體是什么種類的毒藥雖不能定性一樣,抑制率法只能判定蔬菜水果中是否有高殘毒,可能是一種或多種農殘總量貢獻,但不能確定具體農藥種類。人們重點關注的是能否食用,而不是農藥種類!抑制率法經濟、快速、高效,剛好解決了上述的不等式問題。
研究表明,原法中不嚴謹導致測量不穩定,與其它檢測一樣,作為所提供的法律數據,檢測需規范嚴謹。
筆者做了如下改進,1、制樣:干樣品如茶葉類要制成粉,蔬菜水果類水分高的要制成漿,保證樣品的勻一性;2、對提取的分析液增加快速定性濾紙過濾,使溶液清亮透明,因濾紙對緩沖液的吸附作用,所以改樣品中加5ml緩沖液為6ml,且在接過濾液的杯上事先畫好2.5ml刻度線,體積不足時再加少許緩沖液淋洗濾紙及樣品,確保分析液體積基本為2.5ml;3、37℃培養時若因培養箱或水浴加熱過程中蒸發濃縮的要用緩沖液補足2.5ml;4、對于色度過大的吸光度超過光度計讀數限量的,改1cm比色皿為0.5cm;5、出具法律用數據時,取雙杯檢測平均值;6、比色時技巧及注意事項:將培養畢的檢測液置入1cm或0.5cm比皿中讀取吸光度并記錄后,從加入底液起用秒表計時,確保加底液后的顯色反應為準確的3分鐘;對批量樣品的檢測,測吸光度加底液時,從第一個樣加入底液后起計時,按10秒間隔時間按順序依次加入底液的,以便批量操作時能保證每個樣品的反應時間準確為3分鐘時能記錄下吸光度;根據操作人員自己的情況控制每次加底液的顯色杯數,確保加底液后一分鐘后兩分半鐘內能使每杯都能依次盡量搖勻。實踐證明改進后的方法,重現性良好,測出抑制率大于50%以上的,不確定度小于7%,50%以下的不確定度小于5%,對標準內提到的除幾種有刺激性干擾的蔬菜外,完全能滿足仲裁需要,且與相應的色譜圖比對極為吻合。若抑制率法得到廣泛應用與認可,或作為色譜法的篩查,對大幅節省檢測成本、經費支出有重大意義。
在此筆者還有一個建議,就是將每天食用量較少的,或非每天必食的農產品,如水果類的不合格判定抑制率定為90%以上,與主食的蔬菜類的50%以下為合格予以分別對等待,這也符合國際通行做法,如美國農藥限量中,規定甲基硫菌靈在蔬菜類時限量規定為0.1到1mmp左右,而在桃中限量為15,中國蔬菜限量為0.1左右,而水果則為3。
   關于改進和大力推行“乙酰膽堿酯酶抑制率測定蔬菜水果農殘”的建議.pdf

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