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微生物檢測—無菌取樣技術(shù)!

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2022-08-17
核心提示: 食品樣品的采集是微生物檢驗的重要組成部分,用于檢驗的樣品數(shù)量和狀況具有重要意義。這對取樣人員和制樣人員提出了很高的
 食品樣品的采集是微生物檢驗的重要組成部分,用于檢驗的樣品數(shù)量和狀況具有重要意義。這對取樣人員和制樣人員提出了很高的專業(yè)要求,既要保證樣品的代表性和一致性,又要保證整個微生物檢驗過程在無菌操作的條件下進(jìn)行。微生物檢驗樣品的采集大致分為取樣、包裝密封、標(biāo)識、樣品的運輸、接收、保存幾個環(huán)節(jié)。

 

一、樣品的取樣


 

取樣是指在一定質(zhì)量或數(shù)量的產(chǎn)品中,取一個或多個代表性樣品,用于感官、微生物和理化檢驗的全過程。

首先在取樣之前應(yīng)確認(rèn)貨、證是否相符。其次取樣工具要達(dá)到無菌的要求,對取樣具和一些試劑材料應(yīng)提前準(zhǔn)備、滅菌。如果使用不合適的采集工具,可能會破壞樣品的完整性,甚至使樣品采集毫無意義。

應(yīng)根據(jù)不同的樣品特征和取樣環(huán)境,對取樣物品和試劑進(jìn)行事先準(zhǔn)備和滅菌等操作。另外要保證樣品能夠代表整批產(chǎn)品,其檢測結(jié)果應(yīng)具有統(tǒng)計學(xué)有效性,樣品到達(dá)實驗室時的狀況應(yīng)能反映出取樣時產(chǎn)品的真實情況。

取樣時應(yīng)根據(jù)不同的產(chǎn)品類型、產(chǎn)品狀態(tài)等選擇不同的取樣方法和標(biāo)準(zhǔn)。

① 包裝食品:對于直接食用的小包裝食品,盡可能取原包裝,直到檢驗前不要開封,以防污染。對于桶裝或大容器包裝的液體食品,取樣前應(yīng)搖動或用滅菌棒攪拌液體,盡量使其達(dá)到均質(zhì);取樣時應(yīng)先將取樣用具浸入液體內(nèi)略加漂洗,然后再取所需量的樣品,裝入滅菌容器的量不應(yīng)超過其容量的3/4,以便于檢驗前將樣品搖勻;取完樣品后,應(yīng)用消毒的溫度計插入液體內(nèi)測量食品的溫度,并作記錄。盡可能不用水銀溫度計測量,以防溫度計破碎后水銀污染食品;如為非冷藏易腐食品,應(yīng)迅速將所取樣品冷卻至0~4℃。對于大塊的桶裝或大容器包裝的冷凍食品,應(yīng)從幾個不同部位用滅菌工具取樣,使樣品具有充分的代表性;在將樣品送達(dá)實驗室前,要始終保持樣品處于冷凍狀態(tài)樣品一旦融化,不可使其再凍,保持冷卻即可。

② 生產(chǎn)過程中的取樣:劃分檢驗批次,應(yīng)注意同批產(chǎn)品質(zhì)量的均一性;如用固定在貯液桶或流水作業(yè)線上的取樣龍頭取樣時,應(yīng)事先將龍頭消毒;當(dāng)用自動取樣器取不需要冷卻的粉狀或固體食品時,必須履行相應(yīng)的管理辦法,保證產(chǎn)品的代表性不被人為地破壞。

③ 液體產(chǎn)品:通常情況下,液態(tài)產(chǎn)品較容易獲得代表性樣品。液態(tài)產(chǎn)品一般盛放在大罐中,取樣時,可連續(xù)或間歇攪拌,對于較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其完全混勻。較大的樣品(100~500mL)要放在已滅菌的容器中送往實驗室,實驗室在取樣檢測之前應(yīng)將液體再徹底混勻一次。

④ 固體樣品:固態(tài)樣品常用的取樣工具有滅菌的解剖刀、勺子、軟木鉆、鋸子和鉗子等。面粉或奶粉等易于混勻的食品,其成品質(zhì)量均勻、穩(wěn)定,可以抽取小樣品檢測(如100g)。但散裝樣品就必須從多個點取樣,且每個樣品都要單獨處理,在檢測前徹底混勻,并從中取一份樣品進(jìn)行檢測。肉類、魚類的食品既要在表皮取樣叉要在深層取樣。深層取樣時要小心不要被表面污染。有些食品,如鮮肉或熟肉可用滅菌的解剖刀或鉗子取樣;冷凍食品可在未解凍的狀態(tài)下可用鋸子、木鉆或電鉆(一般斜角鉆入)等獲取深層取樣樣品;全蛋粉等粉末狀樣品取樣時,可用滅菌的取樣器斜角插入箱底,樣品填滿取樣器后提出箱外,再用滅菌小勺從上、中、下部位取樣。

⑤ 表面取樣:通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉(zhuǎn)移到合適的培養(yǎng)基中進(jìn)行微生物檢驗,這種惰性載體既不能引起微生物死亡,也不應(yīng)使其增殖。這樣的載體包括清水、拭子、膠帶等。取樣后,要使微生物長期保存在載體上,既不死亡又不增殖十分困難,所以應(yīng)盡早地將微生物轉(zhuǎn)接到適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基中。轉(zhuǎn)移前耽誤的時間越長,品質(zhì)評價的可靠性就越差。表面取樣技術(shù)只能直接轉(zhuǎn)移菌體,不能做系列稀釋,只有在菌體數(shù)量較多時才適用。其最大優(yōu)點是檢測時不破壞樣品。

⑥ 空氣樣品的采取:空氣的取樣方法有直接沉降法和過濾法。在檢驗空氣中細(xì)菌含量的各種沉降法中,平皿法是最早的方法之一,到目前為止,這種方法在判斷空氣中浮游微生物分次自沉現(xiàn)象方面仍具有一定的意義。過濾法是使定量的空氣通過吸收劑,然后將吸收劑培養(yǎng),計算出菌落數(shù)。

 

 

二、樣品的包裝密封


 

為保證樣品的完整性,裝有樣品的包裝物應(yīng)進(jìn)行封口,以證實其可靠性,即從取樣地點至實驗室這段時間不發(fā)生任何變化。可采用自粘膠、特制的紙黏著劑或者石蠟等封口,封口處應(yīng)留有填寫日期、檢驗人員和貨主簽字的地方,然后蓋上專用的印章。

 

 

三、樣品的標(biāo)識


 

取樣過程中應(yīng)對所取樣品進(jìn)行及時、準(zhǔn)確的標(biāo)記。取樣結(jié)束后,應(yīng)由取樣人寫出完整的取樣報告。樣品應(yīng)盡可能在原有狀態(tài)下迅速運送或發(fā)送到實驗室。

 

保存的樣品應(yīng)進(jìn)行必要的清晰的標(biāo)記,內(nèi)容包括:樣品名稱,樣品描述,樣品批號,企業(yè)名稱,地址,取樣人,取樣時間,取樣地點,取樣溫度(必要時),測試目的等。標(biāo)記應(yīng)牢固并具防水性,確保字跡不會被擦掉或脫色。所有盛樣容器必須有和樣品一致的標(biāo)記。在標(biāo)記上應(yīng)記明產(chǎn)品標(biāo)志與號碼和樣品順序號以及其他需要說明的情況。標(biāo)記應(yīng)牢固并具防水性,確保字跡不會被擦掉或脫色。當(dāng)樣品需要托運或由非專職取樣人員運送時,必須封死樣品容器。

 

 

四、樣品的運輸


 

取樣結(jié)束后應(yīng)盡快將樣品送往實驗室檢驗。如不能及時運送,冷凍樣品應(yīng)存放在-15℃以下的冰箱或冷庫內(nèi);冷藏和易腐食品存放在0~4℃ 冰箱或冷藏庫內(nèi);其他食品可放在常溫暗處。微生物檢驗樣品應(yīng)在取樣后6h以內(nèi)送達(dá)實驗室進(jìn)行檢驗。

樣品的運輸過程必須有適當(dāng)?shù)谋Wo(hù)措施(如密封、冷藏等),以保證樣品的微生物指標(biāo)不發(fā)生變化。運送冷凍和易腐樣品應(yīng)在包裝容器內(nèi)加適量的冷卻劑或冷凍劑,但樣品不可與冷卻劑或冷凍劑直接接觸,保證途中樣品不升溫或不融化,必要時可于途中補(bǔ)加冷卻劑或冷凍劑。運送水樣時應(yīng)避免玻璃瓶搖動,水樣溢出后又回流瓶內(nèi),從而增加污染。如不能由專人攜帶送樣時,也可托運。托運前必須將樣品包裝好,應(yīng)能防破損,防凍結(jié)或防易腐和冷凍樣品升溫或融化。在包裝上應(yīng)注明“防碎”、“易腐”、“冷藏”等字樣。同時做好樣品運送記錄,寫明運送條件、日期、到達(dá)地點及其他需要說明的情況,并由運送人簽字。

 

 

五、樣品的接收


 

在接收樣品時,實驗室應(yīng)與送樣人共同相互確認(rèn)樣品與委托單上的內(nèi)容是否一致。確認(rèn)內(nèi)容一般包括:品名;檢驗?zāi)康模粰z驗項目;形狀和包裝狀況(同體、粉狀、冷凍、冷藏、零售、批發(fā)、無菌包裝等都不同);抽樣數(shù)量(個數(shù)和質(zhì)量);抽樣日期及送達(dá)日期;抽樣地點;隨貨樣附帶的許可申請單編號;生產(chǎn)國或者生產(chǎn)廠家名稱(進(jìn)口商品);抽樣者的單位、姓名及有無封印;其他搬運、儲存、檢驗時的注意事項。

 

 

六、樣品的保存


 

實驗室接到樣品后應(yīng)在36h內(nèi)進(jìn)行檢測(貝類樣品通常要在6h內(nèi)檢測),對不能立即進(jìn)行檢測的樣品,要采取適當(dāng)?shù)姆绞奖4妫箻悠吩跈z測之前維持取樣時的狀態(tài),即樣品的檢測結(jié)果能夠代表整個產(chǎn)品。實驗室應(yīng)有足夠和適當(dāng)?shù)臉悠繁4嬖O(shè)施(如冰箱或冰柜等)。保存的樣品應(yīng)進(jìn)行必要和清晰的標(biāo)記,內(nèi)容包括:樣品名稱,樣品描述,樣品批號,企業(yè)名稱、地址,取樣人,取樣時間,取樣地點,取樣溫度(必要時),測試目的等;樣品在保存過程中應(yīng)保持密封性,防止引起樣品pH值的變化。

不同類型的樣品,保存方法不同:

① 易腐樣品:要用保溫箱或采取必要的措施使樣品處于低溫狀態(tài)(0~4℃),應(yīng)在取樣后盡快送至實驗室,并保證樣品送至實驗室時不變質(zhì)。易腐的非冷凍食品檢測前不應(yīng)冷凍保存(除非不能及時檢測)。如需要短時間保存,應(yīng)在0~4℃ 冷藏保存,但應(yīng)盡快檢驗(一般不應(yīng)超過36h),因為保存時間過長會造成樣品中嗜冷細(xì)菌的生長和嗜中溫細(xì)菌的死亡。

② 冷凍樣品:要用保溫箱或采取必要的措施使樣品處于冷凍狀態(tài),送至實驗室前樣品不能融解、變質(zhì)。冰凍樣品要密閉后置于冷凍冰箱(通常為-18℃),檢測前要始終保持冷凍狀態(tài),防止樣品暴露在二氧化碳?xì)怏w中。

③ 其他樣品:應(yīng)用塑料袋或類似的材料密封保存,注意不能使其吸潮或水分散失,并要保證從取樣到實驗室進(jìn)行檢驗的過程中其品質(zhì)不變。必要時可使用冷藏設(shè)備。

編輯:songjiajie2010

 
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