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細菌抗酸染色法

放大字體  縮小字體 發布日期:2012-08-13  來源:丁香通
核心提示: 細菌抗酸染色法
 
1、原理與應用
結核分枝桿菌對苯胺染料一般不易著色,若加溫或延長染色時間使其著色后,再用3%鹽酸酒精處理也不易脫色,經此染色后,結核分枝桿菌及其他分枝桿菌呈紅色,而非抗酸菌和細胞雜質等呈藍色。
 
2、材料
(1)結核病人痰
(2)抗酸染色液
(3)玻片、片夾、濾紙片、竹簽、空平皿、污物盆。
 
3、方法
(1)取潔凈的竹簽沾取痰中血絲或膿性痰,在清潔無油脂玻片上涂開。涂抹區約拇指蓋大。用過的竹簽放到空平皿內待高壓滅菌。
(2)涂片自然干燥后,用片夾挾住玻片一端,通過火焰固定。
(3)涂抹面用濾紙片蓋上,然后往濾紙片上滴加石炭酸復紅染液,使濾紙片完全被染液浸濕,持玻片在小火上加溫片刻然后離開火焰,此時可見到玻片上冒出蒸氣。待蒸氣消失后再加溫,如此反復3~4次,約5min,加溫時隨時添加染液勿使紙片干涸。
(4)玻片冷卻后,用接種環挑去濾紙扔到污物盆內,流水沖洗玻片。
(5)滴加3%鹽酸酒精脫色,至涂抹均勻部位基本沒有紅色再脫下為止,水洗。
(6)滴加呂氏美藍染液30sec,水洗。
(7)吸干、鏡檢。
 
4、溶液配制
萋-尼(Zichl-Neelsen)抗酸染色液
(1)石炭酸復紅液:鹼性復紅4g,溶于95%酒精100ml,作成飽和溶液,再取該飽和液10ml與5%石炭酸溶液90ml混勻即成。
(2)3%鹽酸酒精液。
濃鹽酸3ml加入95%酒精97ml中即成。
(3)呂(Loeffer)氏美藍染色液
美藍2g,溶于95%酒精100ml中,作成飽和液。再取該飽和液30ml與0.01%氫氧化鉀水溶液100ml混合均勻即可。
 
編輯:songjiajie2010

 
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關鍵詞: 細菌 抗酸 染色
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