對(duì)于比較普遍的蛋白質(zhì)檢測(cè)我們匯總了大家的問(wèn)題，進(jìn)行答疑：

一、當(dāng)測(cè)定的樣品是液體時(shí)，也是稱取質(zhì)量嗎？
樣品取體積還是稱質(zhì)量要看執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)中的限量單位。如果限量單位是體積則取體積，是質(zhì)量則稱質(zhì)量。
二、測(cè)定液體時(shí)稱樣量能不能減少到5g？
主要看樣品的蛋白質(zhì)含量，控制稱取的樣品含氮量在30mg~40mg是比較合理的。

三、玉米淀粉的稱樣量是多少？

玉米淀粉中蛋白質(zhì)含量很低，滴定法更適用于蛋白質(zhì)含量為常量的樣品，不適合這種微量樣品的檢測(cè)。

四、消化過(guò)程中硫酸銅、硫酸鉀加多加少有影響嗎？
催化劑的添加量要求不是特別嚴(yán)格，其添加量稍有偏差對(duì)結(jié)果的影響不大，但不要過(guò)多或過(guò)少。

五、全自動(dòng)凱氏定氮儀測(cè)定蛋白質(zhì)怎樣才能消化完全？
控制樣品稱樣量在合理范圍。原則上樣品越少，越容易消化，但樣品量太少計(jì)量的誤差會(huì)變大。所以要控制稱取的樣品量使其含氮量在30mg~40mg是比較合理的。

消化劑的添加要足夠。比如在硫酸不足的情況下，過(guò)多的硫酸鉀會(huì)形成硫酸氫鉀而不與氨作用，因此當(dāng)硫酸過(guò)多被消耗或樣品中脂肪含量過(guò)高時(shí)，可適度增加硫酸的量。

六、自動(dòng)凱氏定氮法中指示劑甲基紅和溴甲酚綠是1:5的配比，配比稍有變化影響大嗎？
國(guó)標(biāo)中給的兩種指示劑，其中B指示劑的配比是甲基紅乙醇溶液與溴甲酚綠乙醇溶液的配比為1:5。指示劑的比例不同，顏色會(huì)有變化，對(duì)結(jié)果影響不大，主要配合試劑空白的顏色反應(yīng)來(lái)看反應(yīng)結(jié)果。
七、自動(dòng)凱氏定氮和凱氏定氮是不是用的氫氧化鈉溶液濃度不一樣？
一樣的，都是使用400g/L的氫氧化鈉溶液。
八、蒸餾過(guò)程中，火力控制在多大？
能保證液體沸騰，且產(chǎn)生的蒸汽充足、均勻即可。

九、蒸餾過(guò)程中，總是倒流怎么辦？

要保證蒸餾裝置不漏氣，使用前進(jìn)行裝置的檢漏。

蒸餾時(shí)，要保證蒸汽均勻、充足，中間不能停止加熱或減小火力，防止產(chǎn)生倒吸。

蒸餾完畢后先將冷凝管下端提離頁(yè)面，蒸餾1min后取下接收瓶，最后關(guān)掉熱源，否則可能會(huì)發(fā)生倒吸。

十、蒸餾過(guò)程中，反應(yīng)液為什么跑到反應(yīng)室外層？

當(dāng)熱源不夠穩(wěn)定，提供的蒸汽不均勻時(shí)會(huì)導(dǎo)致此現(xiàn)象的產(chǎn)生。比如停火或者加熱的溫度降低時(shí)，由于反應(yīng)室外層的壓力突然降低，可使液體吸入反應(yīng)室外層，所以操作時(shí)一定要保證加熱產(chǎn)生的蒸汽充足、均勻。

十一、加了指示劑的硼酸可以保存多久？

混合指示劑需要臨用現(xiàn)配，不建議長(zhǎng)期保存。

十二、含乳飲料的蛋白質(zhì)折算系數(shù)用哪個(gè)？

含乳飲料的蛋白質(zhì)折算系數(shù)要看飲料中的蛋白質(zhì)來(lái)源，如果來(lái)源僅為純?nèi)榛蚣內(nèi)橹破罚瑒t蛋白質(zhì)用6.38。如果飲料中蛋白質(zhì)來(lái)源較多用6.25。

十三、蛋白質(zhì)測(cè)定偏低的原因？蛋白質(zhì)的稱樣量過(guò)多會(huì)導(dǎo)致蛋白質(zhì)偏低嗎？
導(dǎo)致蛋白質(zhì)測(cè)定偏低的原因較多：樣品消化不完全、裝置漏氣導(dǎo)致氨的溢出、操作不當(dāng)、稱樣量不合理等均會(huì)導(dǎo)致結(jié)果偏低。

稱樣量過(guò)多會(huì)造成結(jié)果偏低。主要還是要看樣品，提前預(yù)估蛋白質(zhì)含量，從而掌握合理的稱樣量。一般控制蛋白質(zhì)含量在0.2g左右，加入0.4g硫酸銅、6g硫酸鉀及20mL濃硫酸是比較合理的消化方法。

十四、怎么驗(yàn)證蛋白質(zhì)測(cè)定的準(zhǔn)確性？
檢查精密度，平行樣的絕對(duì)差值不超過(guò)算數(shù)平均值的10%。

也可以通過(guò)儀器比對(duì)、人員比對(duì)、留樣再測(cè)、加標(biāo)回收等方式驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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