二、紫外可見分光光度計的工作原理

1、紫外可見分光光度計基本工作原理和紅外光譜儀相似，利用一定頻率的紫外可見光照射被分析的有機物質，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。一組吸收隨波長而變化的光譜，反映了試樣的特征。

2、紫外可見光的范圍內，對于一個特定的波長，吸收的程度正比于試樣中該成分的濃度，因此測量光譜可以進行定性分析，而且根據吸收與已知濃度的標樣的比較，還能進行定量分析。

三、首次使用紫外可見分光光度計人員須知

1、首次使用紫外可見分光光度計的人員，一般來說，一定要詳細閱讀儀器安全操作手冊，否則嚴禁操作儀器。準備操作儀器前，需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下，表面指針是否指向零刻度。如若不是，理應先調零然后才能連接電源。在使用的過程中，操作員應該盡量避免對鏡燈的觸碰，放大器使用過后，一定需要把檔位歸置到零。

2、除此之外，在操作紫外可見分光光度計時，操作人員需要留意一下機器的干燥劑，因為這是非常重要的。通常情況下，干燥劑有效時，儀器的工作是不會出現任何問題的。可是當干燥劑失效之后，所出現的問題是非常嚴重的。除了儀器上面顯數不準之外，很容易使反射鏡變得污穢，從而使得光線率不準確。因此，日常使用儀器時，一定要注意干燥是否有效。當發現失效后，要及時進行更換。

四、分光光度計使用注意事項

1、紫外可見分光光度計在開機前將樣品室內的干燥劑取出，儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
2、筆式PH計測定時，禁止將試劑或液體物質放在儀器的表面上，如有溶液溢出或其它原因將樣品槽弄臟，要盡可能及時清理干凈。
3、比色皿內溶液以皿高的2/3～4/5為宜，不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應保持比色皿清潔，池壁上液滴應用擦鏡紙擦干，切勿用手捏透光面。測定紫外波長時，需選用石英比色皿。
4、實驗結束后將比色皿中的溶液倒盡，然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈，倒立晾干。關電源將干燥劑放入樣品室內，蓋上防塵罩，做好使用登記，得到管理老師認可方可離開。

五、紫外可見分光光度計出現問題處理方法

1、儀器電源接通后，光源不亮。

原因：

①光源燈泡已損壞。

②保險管燒壞。

處理方法：

①更換氘燈或鎢燈。

②更換保險管。

2、紫外可見分光光度計噪音較大。

原因：光源燈泡使用時間超過壽命期。

處理方法：更換光源燈泡。

3、自檢時提示波長自檢出錯。

原因：自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。

處理方法：關上儀器樣品室蓋子，重新自檢。

4、儀器自檢時提示通訊錯誤。

原因：儀器與電腦之間的數據線沒有連接好。

處理方法：連接好數據線，重新打開儀器和軟件，重新自檢。

5、儀器零點飄忽不定，主要反映在簡易儀器上。

原因：在簡易儀器中，零點往往是通過電位器來調整，這種電位器一般是炭膜電阻制作的，使用久了往往造成接觸不良。

處理方法：更換電位器。

6、在使用過程中，出現數字顯示不能歸零，同時伴有圖線記錄基線位置偏高。

原因：

①光電倍增等老化，性能降低。

②信號處理板可能發生故障。

③前置放大版出現故障，引起反饋量增大。

處理方法：

①開機通電，先做記錄故障曲線，再與原始記錄的標準曲線對照，找出異同點，并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規格的新光電倍增管替換機上的光電管，再開機實驗，結果記錄出來的圖線并沒有什么變化，由此證明光電倍增管沒有老化變質。

②進一步檢查信號處理板，未發現信號處理板各元器件損壞，對影響靈敏度有關的電位器檢測，結果測得數據正常，這說明信號處理板沒有故障。

7、測試過程中提示能量太低。

原因：

①光源燈泡使用時間超過壽命期。

②樣池中有不透光的東西擋住了光。

處理方法：

①更換光源燈。

②拿走擋光的物品。

8、吸光值結果出現負值（最常見）。

原因：沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液。

處理方法：做空白記憶、調換參比液或用參比液配置樣品溶液。

9、當儀器波長固定在某個波長下時，吸光值信號上下擺動，特別是測量模式轉換為按鍵開關式的簡易儀器。

原因：開關觸點因長期氧化所致造成接觸不良。

處理方法：用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可。

10、樣品信號重現性不良

原因：排除儀器本身的原因外，最大的可能是樣品溶液不均勻所致，在簡易的單光束儀器中，樣品池架一般為推拉式的，有時重復推拉不在同一個位置上。

處理方法：

①采取正確的試樣配置手段。

②修理推拉式樣品架的定位碰珠。