1. 實(shí)驗(yàn)原理　人的外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)方法是1960年由Moorhead 提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細(xì)胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)72 h就可獲得大量的有絲分裂細(xì)胞。這種取材簡易、用血量少的培養(yǎng)方法已被廣泛采用。

在培養(yǎng)液中加入植物血凝素（PHA），淋巴細(xì)胞受到刺激可轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，進(jìn)入有絲分裂。短期培養(yǎng)后，經(jīng)秋水仙素處理，可抑制細(xì)胞分裂時(shí)紡錘絲的形成，使細(xì)胞分裂停止在中期，同時(shí)它可改變細(xì)胞質(zhì)的黏度，引起染色體在細(xì)胞質(zhì)中分散。經(jīng)低滲和固定，即可得到大量的、分散效果好的染色體分裂象。人體的1ml外周血中一般含有約（1～3）×106個(gè)小淋巴細(xì)胞，足夠染色體標(biāo)本制備和分析之用。本 節(jié)介紹人外周血淋巴細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)法，以及染色體標(biāo)本的制備。

2. 試劑與器材

（1）2ml注射器、培養(yǎng)瓶、刻度吸管，需15磅滅菌20min。離心管、吸管、量筒、載玻片，經(jīng)洗液按常規(guī)清洗、烘干備用。

（2）超凈工作臺，恒溫培養(yǎng)箱，天平，離心機(jī)、顯微鏡等。

（3）試劑：

① 培養(yǎng)基的配制：

RPMI 1640培養(yǎng)基     4ml

小牛血清            1ml

青霉素和鏈霉素      各100IU/ml

PHA                 0.2ml

肝素                1小滴

以5% NaHCO3調(diào)pH至7.2～7.4, 4℃?zhèn)溆谩?/div>