志賀氏菌在這些培養(yǎng)基上呈現(xiàn)無(wú)色透明不發(fā)酵乳糖的菌落。

　　附：HE瓊脂平板原理及照片

　　　SS平板原理及照片

　　　麥康凱瓊脂平板照片　

　　　伊紅美藍(lán)瓊脂平板照片

　　　在沙門氏菌的檢驗(yàn)中，有時(shí)也使用HE、SS平板進(jìn)行初步篩選。

　　　SN 0332-94 出口食品中沙門氏菌(辛酯酶熒光)檢驗(yàn)方法

　　挑取平板上的可疑菌落，接種三糖鐵瓊脂和葡萄糖半固體各1管。一般應(yīng)多挑幾個(gè)菌落，以防遺漏，經(jīng)36℃培養(yǎng)18～24h，分別觀察結(jié)果。

　　附：葡萄糖半固體原理及結(jié)果。

　　　 　三糖鐵瓊脂現(xiàn)象及原理分析

　　下述培養(yǎng)物可以棄去：
a.　在三糖鐵瓊脂斜面上呈蔓延生長(zhǎng)的培養(yǎng)物；
b.　在18～24h內(nèi)發(fā)酵乳糖、蔗糖的培養(yǎng)物；
c.　不分解葡萄糖和只生長(zhǎng)在半固體表面的培養(yǎng)物；
d.　產(chǎn)氣的培養(yǎng)物；
e.　有動(dòng)力的培養(yǎng)物；
f.　產(chǎn)生硫化氫的培養(yǎng)物。

　　凡是乳糖、蔗糖不發(fā)酵，葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀氏菌6型可產(chǎn)生少量氣體)，無(wú)動(dòng)力的菌株，可做血清學(xué)分型和進(jìn)一步的生化試驗(yàn)。

三、血清學(xué)分型
挑取三糖鐵瓊脂上的培養(yǎng)物，做玻片凝集試驗(yàn)。

　　先用4種志賀氏菌多價(jià)血清檢查，如果由于K抗原的存在而不出現(xiàn)凝集，應(yīng)將菌液煮沸后再檢查；

　　如果呈現(xiàn)凝集，則用A1、A2、B群多價(jià)和D群血清分別試驗(yàn)。

　　如系B群福氏志賀氏菌，則用群和型因子血清分別檢查。福氏志賀氏菌各型和亞型的型和群抗原見(jiàn)表1。可先用群因子血清檢查，再根據(jù)群因子血清出現(xiàn)凝集的結(jié)果，依次選用型因子血清檢查。
4種志賀氏菌多價(jià)血清不凝集的菌株，可用鮑氏多價(jià)1、2、3分別檢查，并進(jìn)一步用1～15各型因子血清檢查。如果鮑氏多價(jià)血清不凝集，可用痢疾志賀氏菌3～12型多價(jià)血清及各型因子血清檢查。

　　附：福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原

四、進(jìn)一步的生化試驗(yàn)
在做血清學(xué)分型的同時(shí)，應(yīng)做進(jìn)一步的生化試驗(yàn)，即：

　　除宋內(nèi)氏菌和鮑氏13型為烏氨酸陽(yáng)性外，志賀氏菌屬的培養(yǎng)物均為陰性結(jié)果。

　。必要時(shí)還應(yīng)做革蘭氏染色檢查和氧化酶試驗(yàn)，應(yīng)為氧化酶陰性的革蘭氏陰性桿菌。生化反應(yīng)不符合的菌株，即使能與某種志賀氏菌分型血清發(fā)生凝集，仍不得判定為志賀氏菌屬的培養(yǎng)物。
已判定為志賀氏菌屬的培養(yǎng)物，應(yīng)進(jìn)一步做

　　5%乳糖發(fā)酵

　　甘露醇

　　棉子糖

　　甘油的發(fā)酵

　　靛基質(zhì)試驗(yàn)

　　志賀氏菌屬4個(gè)生化群的培養(yǎng)物，應(yīng)符合該群的生化特性。但福氏6型的生化特性與A群或C群相似。

　　附：志賀氏菌屬四個(gè)群的生化特性

五、結(jié)果報(bào)告：綜合生化和血清學(xué)的試驗(yàn)結(jié)果判定菌型并作出報(bào)告。