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平板接種菌之后沒有菌落生長的情況分析

放大字體  縮小字體 發(fā)布日期:2024-05-15
核心提示: 我們做微生物實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,常用平板接種菌落,經(jīng)常會(huì)遇到在給平板接種菌之后卻沒有菌落生長的情況。今天,我們來分析一下出
 我們做微生物實(shí)驗(yàn)的時(shí)候,常用平板接種菌落,經(jīng)常會(huì)遇到在給平板接種菌之后卻沒有菌落生長的情況。今天,我們來分析一下出現(xiàn)這種情況的原因。本文將從菌種、人員操作、培養(yǎng)基和添加劑三個(gè)方面來分析。

一、菌種原因

 

  1. 菌種老化

    菌種如果經(jīng)過連續(xù)頻繁的傳代達(dá)十幾次甚至幾十次,就會(huì)造成菌種老化,岀現(xiàn)生長緩慢甚至不生長的情況。

  2. 野生菌種

    相比于標(biāo)準(zhǔn)菌株,有一些野生分離的菌種本身比較脆弱,對(duì)營養(yǎng)要求比較高,對(duì)外界不良環(huán)境也比較敏感,難以在普通的平板上生長,往往需要加入特殊的營養(yǎng)物質(zhì)。

  3. 菌種沒有進(jìn)行充分活化

    當(dāng)我們拿到一株菌的時(shí)候,該菌種往往是處于—個(gè)保藏狀態(tài)的,這就需要我們通過合適的培養(yǎng)基來逐代擴(kuò)大培養(yǎng),得到活力旺盛的菌株,所以充分活化的目的就是要讓菌種逐漸適應(yīng)培養(yǎng)環(huán)境,從而在平板上快速生長。

  4. 樣品中的菌

    有的樣品中本身含菌量就較少,如水樣、供試液等,接種量低造成平板上無菌生長。還有的樣品中含有一些抑菌成分,會(huì)殺死樣品中的菌,導(dǎo)致無菌落生長。

  5. 購買的商品化菌株

    有一些商品化的菌株,如益生菌、菌肥、可食用真菌等,本身進(jìn)行過基因改造,不能進(jìn)行連續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng),故在平板上難以生長。

二、人員操作不當(dāng)

 

1、容器未洗刷干凈,殘留的抑菌成分導(dǎo)致菌不生長。

2、培養(yǎng)基配置過程中稱量錯(cuò)誤,加入添加劑比例錯(cuò)誤等。

3、過度滅菌,有很多培養(yǎng)基成分不耐高溫,過度滅菌會(huì)導(dǎo)致成分失效。

4、調(diào)pH值錯(cuò)誤,不同溫度下培養(yǎng)基的pH值也會(huì)不一樣,未正確的調(diào)配pH值,也會(huì)導(dǎo)致菌不生長。

5、在實(shí)驗(yàn)操作過程中失誤,特別是在稀釋菌液過程中少接或者錯(cuò)接菌。

6、未放置合適的培養(yǎng)條件,根據(jù)不同菌對(duì)氧氣的需求程度,可以分為需氧、厭氧、需氧培養(yǎng)等。根據(jù)不同菌對(duì)溫度的需求,又可以在25°C、30°C、35°C、42°C、56°C等不同溫度下培養(yǎng)。

三、培養(yǎng)基及添加劑原因

 

1、成品培養(yǎng)基本身質(zhì)量不好,如原材料純度不高、含有抑菌成分、原材料之間配比錯(cuò)誤等都會(huì)導(dǎo)致成品培養(yǎng)基不合格。

2、特殊培養(yǎng)基及添加劑未正確存放,未遮光、冷藏、嚴(yán)格密封保存等導(dǎo)致失效。

3、培養(yǎng)基及添加劑超過有效期或者臨近有限期,營養(yǎng)成分存在一定程度的失效導(dǎo)致菌不生長。

4、培養(yǎng)基及添加劑營養(yǎng)不夠或者不適合培養(yǎng)某類菌種。有一些菌種本身營養(yǎng)要求比較特殊,需要添加某些特殊營養(yǎng)后方能生長。

5、培養(yǎng)基pH值發(fā)生改變,有一些特殊的成品培養(yǎng)基pH值隨時(shí)間會(huì)存在一定程度的改變,在使用前需要對(duì)pH值重新進(jìn)行調(diào)整,否則也會(huì)導(dǎo)致菌不生長。

編輯:songjiajie2010

 
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